ELISA ak move rezilta?Swiv nou pou w chwazi plak Elisa ki kòrèk la.
Chwazi yon plak ELISA apwopriye se premye etap la nan yon eksperyans ELISA siksè, men anpil moun inyore sa a. Lè moun fè eksperyans, yo souvan sèlman konsidere eksperyans nan tèt li, men yo pa konnen ke pwodwi a souvan gen yon gwo enpak sou eksperyans la. Seleksyon apwopriye nan pwodwi yo pral kontribye nan siksè nan eksperyans la. Anjeneral nou konsidere faktè sa yo lè n ap fè eksperyans ELISA:
1.Fòm nan anba a
Kounye a, manifaktirè yo konsepsyon pwi ki make anzim yo kòm kolòn endepandan, epi yon fason apwopriye ogmante distans ki genyen ant pwi yo pou yo ka separe poukont yo, kidonk minimize kwa-kontaminasyon. Diferan kalite plak Elisa gen diferan fòm anba a byen. Men kèk fòm twou komen anba:
Plat anba: anba a se orizontal, yo rele tou F anba. Limyè a pa pral devye nan pati anba a, ki ka transmèt limyè a nan pi gwo limit. Sèvi ak pou eksperyans ki mande yon anba wonn pou vizibilite oswa lòt rezon.
Anba wonn: Konnen tou kòm U-anba, bay pi bon rezilta netwayaj ak pèfòmans ibrid, apwopriye pou aplikasyon ki bezwen teste sediman yo.
C-anba: Li ka bay yon efè netwayaj bon ant anba a plat ak anba a wonn, pandan y ap konbine avantaj ki genyen nan anba a plat.
Anba kòn: Konnen tou kòm V-anba, li apwopriye pou echantiyon egzak ak depo echantiyon mikwo pou rekiperasyon optimal nan ti volim.
2. Koulè plak Elisa
Gen twa koulè plak Elisa: transparan, nwa ak blan.
Majorite ELISA chwazi plak transparan kòm materyèl eksperimantal. Plak Elisa blan ak nwa yo jeneralman yo itilize pou deteksyon luminesans. Plak ELISA nwa a li menm absòbe limyè, kidonk siyal li pi fèb pase plak ELISA blan an. Plak nwa Elisa yo jeneralman itilize pou detekte limyè ki pi fò, tankou deteksyon fliyoresan; okontrè, plak blan Elisa ka itilize pou deteksyon limyè pi fèb, epi yo souvan itilize pou devlopman jeneral chemiluminescence ak substra koulè (tankou doub luciferase). analiz jèn repòtè yo).
3. Materyèl plak Elisa
Materyèl komen yo se polyethylene (PE), polypropylène (PP), polystyrène (PS), klori polyvinyl (PVC) ak polikarbonat (PC).
Materyèl ki pi lajman itilize nan ELSIA yo se polystyrène ak klori polyvinyl. Polyvinyl klori tablo mou se mens, ka koupe, ak pri a ba. Dezavantaj la se ke fini an se pa kòm bon jan tablo a polystyrène, ak anba a nan twou a se pa tankou plat tankou polystyrène. Men, valè background korespondan an ap ogmante tou. Anjeneral, tretman iyon grèf yo te pote sou sifas plak ELISA, ak gwoup fonksyonèl aktif tankou gwoup aldehyde, gwoup amine, ak gwoup epoksidik yo prezante nan sifas polymère a pou amelyore pèfòmans sifas substra a.
4. diferan Liaison mécanismes
Liaison efikas nan materyèl la kouch nan sifas anba plak la se yon etap enpòtan nan ELISA. Se poutèt sa, karakteristik estriktirèl yo ak pwopriyete chimik sibstans ki sou yo dwe kouvwi yo ta dwe ak anpil atansyon analize anvan eksperyans nan chwazi yon plak apwopriye Elisa. Anjeneral pale, gen plizyè fason pou mare materyèl la kouch nan pati anba a nan plak la: adsorption pasif, obligatwa kovalan ak kaptire afinite.
Adsorption pasif: Mekanis nan adsorption pasif se konplèks, ak obligatwa ki genyen ant materyèl la kouch ak anba a nan plak la sitou depann sou fòs entèmolekilè (fòs van der Waals) ak lyezon idwojèn. Nan pifò ELISA yo, se adsorption pasif ki fè lyezon sibstans kouch nan anba plak la. Anjeneral, se obligatwa ki genyen ant mwayen ak gwo antijèn pwa molekilè (oswa antikò) ak anba a nan plak la akonpli pa adsorption pasif. Karakteristik idrofob / idrofil sifas anba plak la souvan konsidere lè w ap chwazi yon plak Elisa. Tablo sa a bay lis sijè ki abòde aplikasyon ak itilizasyon diferan sifas substra idrofil:
idrofil | Priyorite obligatwa | Itilizasyon prensipal la |
- | Molekil ki genyen rejyon idrofob enpòtan, tankou: lipid, lipoprotein, gwo pwoteyin. | Antigen ELISA, FlA, LIA |
plis | Biomolekil ak pwopriyete idrofil/idrofob tankou: pwoteyin mwayen ak gwo, imunoglobulin, albumin. | Double Antibody Sandwich ELISA, Antigen ELISA |
plis plis | Biomolekil ki gen pwopriyete idrofil/idrofob tankou: ti ak gwo pwoteyin, imunoglobulin, albumin, LPS, pwoteyin fosforil, glikoprotein. | Double antikò ELISA, FIA, LIA |
plis plis plis | Glikoprotein, molekil lipid polè, fosfolipid, kardiolipid | ELISA antijèn |
Capture Affinity: Kapti afinite baze sou lyezon espesifik makromolekil ki make ak reseptè korespondan yo. Tagged makromolekil yo ka jwenn swa pa kouple chimik oswa pa jeni jenetik.
Karakteristik Affinity Capture yo se:
1.segondè espesifik
2.Ka amelyore rapò siyal-a-bri nan rezilta mezi
Pi komen sifas anba yo se: streptavidin (streptavidin) sifas kouvwi; nikèl chelate (Nikèl Chelate) sifas kouvwi ak glutatyon (Glutathione, GSH) sifas kouvwi.
3. Streptavidin sifas: segondè afinite ak espesifik nan streptavidin ak biotin yo itilize reyalize obligatwa nan plak la anba nan pwoteyin nan kouvwi.
4. Nikèl chelate sifas: Nikèl chelate tache ak sifas polymère pou mare fusion protéines ak His (histidine) baj.
5. Glutathione sifas: Sèvi ak anzim ak substra espesifik ant glutathione ak glutatyon sulfhydryltransferase (GST) pou reyalize obligatwa plak anba a nan pwoteyin rad la.
Poukisa chwazi plak BKMAM Elisa?
Te fè nan materyèl 100 pousan polystyrène,
Apwopriye pou kilti selil aderan,
Baz plat, menm epesè ak gwosè inifòm pou poto reyaksyon,
Esteril ak pake endividyèl,
Segondè bon jan kalite ak pri faktori.
